PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)及建設(shè)要求 

概述: PCR實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。是一種分子生物學(xué)技術(shù)。PCR實(shí)驗(yàn)室可分為四個(gè)單獨(dú)區(qū)域:試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。 PCR實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)格的凈化要
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PCR實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。是一種分子生物學(xué)技術(shù)。PCR實(shí)驗(yàn)室可分為四個(gè)單獨(dú)區(qū)域:試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。

PCR實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)格的凈化要求,為避免各實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉污染,進(jìn)入各個(gè)工作區(qū)域須遵循單方向進(jìn)行,即只能從試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。


PCR試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)

試劑和用于樣品制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū),不得經(jīng)過(guò)其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。
PCR標(biāo)本制備區(qū)
該區(qū)域主要進(jìn)行樣本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定DNA的合成。
本區(qū)的壓力梯度要求為:鄰近區(qū)域?yàn)檎龎,避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。由于在加樣操作中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠所致的污染,所以應(yīng)避免在本區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)。

擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)

已制備的DNA模板 (來(lái)自樣本制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來(lái)自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。
本區(qū)的壓力梯度要求為:鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染,應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動(dòng)。個(gè)別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。

擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)

本區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來(lái)源,因此對(duì)本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域。

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